斑馬魚敲降CRISPRi法與MO（嗎啡啉）法比較

一、基因敲降的前期準備工作相同1.1?生物信息學(xué)分析目標基因在斑馬魚早期胚胎發(fā)送過程中是否有表達。1.2?收集斑馬魚早期發(fā)育胚胎（通常為48?hpf?前的胚胎），提取總RNA，然后進行體外轉(zhuǎn)錄（RT）。1.3?設(shè)計檢測目標基因表達的PCR?引物，以1.2獲得的cDNA?為模板，進行PCR?擴增，確認目標基因在早期有表達。二、MO法與CRISPRi法的敲降原理不同2.1?MO?是在轉(zhuǎn)錄后水平上敲降基

斑馬魚基因功能研究-基因敲降

一般推薦MO+CRISPRi兩種策略去同時敲降一個基因，由于MO是在轉(zhuǎn)錄后水平上敲降基因的功能，而CRISPRi是在轉(zhuǎn)錄水平上敲降基因的功能，使用兩種獨立的、原理完全不同的敲降方法，如果給出的敲降效果（表型）是一樣的，那么這樣建立的敲降方法可以被認可是有效且特異的。請大家注意：評價基因敲降效果需要從有效和特異兩個方面來考慮。有效性問題：CRISPRi敲降的有效性可以通過RT-PCR法檢測目標基因表

斑馬魚應(yīng)用于遺傳毒性評價

用斑馬魚進行染毒實驗，然后進行毒性評價