科研服務
SCIENTIFIC SERVICE
基因敲除細胞系的建立
1.服務信息
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流程分布 |
周期工作日 |
提交內容 |
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CRISPR設計 |
2 |
專業(yè)設計報告 |
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客戶確認 |
1-2 |
客戶回復 |
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引物合成 |
2 |
獲得引物 |
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質粒構建，引物測試及目標基因擴增 |
6 |
階段報告 |
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質粒轉染細胞 |
6-8 |
階段報告（提供熒光照片） |
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活性驗證 |
7-10 |
階段報告 |
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獲得單克隆細胞 |
35 |
獲得30個細胞株 |
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單細胞株突變體鑒定 |
10 |
總結報告 |
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總周期：3-3.5月 |
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2.基因組編輯動物細胞系建系流程圖：
3.服務流程
案例展示
案例說明
Ｘ建立基因組編輯細胞系的優(yōu)選策略之多個sgRNA同時使用以高效實現目標基因的靶向突變：
雖然有報道利用一對sgRNA，可以刪除長至200 kb的基因組DNA片段，但是刪除100-200 bp相較而言更容易實現，更為重要的同時使用多個sgRNA，可顯著提高基因組靶向突變的成功率，如果實現刪除則有利于后面篩選時的基因型鑒定。
在哺乳動物的基因組編輯中，一般建議同時使用(測試)3個sgRNA
以提高工作效率
參考文獻
參考文獻
Ｘ參考文獻
